反相填料常是以硅膠為基礎，表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。 反相色譜所使用的流動相極性較強，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。 樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合先被沖出，而極性弱的組份會在色譜柱上有 更強的保留。 常用的反相填料有YMC C18填料(ODS)，C8(MOS)，C4(B)，C6H5(Phenyl)等。

　　聚合物調料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要優點是在PH值為1～ 14均可使用。 相對與硅膠基質的YMC C18填料，這類填料具有更強的疏水性;大孔的聚合物填料對蛋白 質等樣品的分離非常有效。 現在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質填料，色譜柱柱效較低。

　　反相填料的較大特性是具有非常高的表面鍵合覆蓋率，是不同性質有機化合物分離的理想選擇。通過在生產過程中的嚴格控制，使之*封尾，對酸性和堿性以及螯合物樣品具有*的分離性能。反相填料采用自主開發的球形多孔硅膠生產工藝，并對硅膠的硅烷化反應進行了系統研究，建立起了制備球形液相反相填料的優化條件。所生產的球形多孔硅膠具有粒徑分布均勻，孔徑分布范圍窄，比表面積可控，表面官能團濃度高和機械強度高等特點，完滿足現代液相色譜的要求。

　　反相填料在干燥狀態下為透明無孔凝膠，但是通過有機溶劑溶脹后可以變成具有分子篩性能的多孔網狀結構，凝膠填料*溶脹后，孔徑和排阻極限由交聯度和洗脫劑決定。可以在苯、甲苯、二甲苯、二氯甲烷、四氯化碳、二甲基甲酰胺酮及混合有機溶劑中溶脹分離。可用于親脂性多聚物和有機洗脫溶質的分子量、結構類似物體積排阻層析，也可以分析分子體積不同、具有相同化學性質的高分子同系物。